【產(chǎn)品名稱(chēng)】
通用名稱(chēng)：甲型肝炎病毒IgM抗體檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
【包裝規(guī)格】
48人份/盒、96人份/盒。
【預(yù)期用途】
適用于定性測(cè)定人血清或血漿中甲型肝炎病毒IgM抗體（抗-HAVIgM）。
用于甲型肝炎的早期輔助診斷。
【檢驗(yàn)原理】
本試劑盒系用抗人IgM(μ鏈)包被的微孔板，甲型肝炎(HAV)抗原和酶標(biāo)記的抗甲型肝炎病毒(抗-HAV)及其他試劑制成，應(yīng)用捕獲法原理檢測(cè)人血清樣本中的甲肝IgM抗體（抗-HAVIgM），用于甲型肝炎的早期輔助診斷。
【主要組成成分】
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試劑盒組成 |
48人份/盒 |
96人份/盒 |
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1.預(yù)包被反應(yīng)板 |
48孔/塊×1塊 |
96孔/塊×1塊 |
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2.酶結(jié)合物 |
3mL×1瓶 |
6mL×1瓶 |
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3.陽(yáng)性對(duì)照 |
0.5mL×1瓶 |
0.5mL×1瓶 |
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4.陰性對(duì)照 |
0.5mL×1瓶 |
0.5mL×1瓶 |
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5.濃縮洗滌液 |
30mL×1瓶 |
30mL×1瓶 |
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6.顯色劑A |
3mL×1瓶 |
6mL×1瓶 |
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7.顯色劑B |
3mL×1瓶 |
6mL×1瓶 |
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8.終止液（2M H2SO4） |
3mL×1瓶 |
6mL×1瓶 |
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9. 甲肝抗原 |
3mL×1瓶 |
6mL×1瓶 |
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10.封板膠紙 |
2片 |
2片 |
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11.自封袋 |
1只 |
1只 |
注意：不同批號(hào)試劑盒中試劑盒組成1、2 不可混用。
各組份組成：
酶結(jié)合物：Na2HPO4·12H2O 2.9g/L；KH2PO4 0.2g/L；KCl 0.2g/L；NaCl 8g/L；乙二醇 150mL/L；小牛血清 500mL/L；指示劑1 1.25mL/L；硫柳汞 1g/L；抗-HAV-HRP 適量。
陽(yáng)性對(duì)照：Na2HPO4·12H2O 2.9g/L；NaCl 8g/L；KCl 0.2g/L；KH2PO4 0.2g/L；乙二醇150mL/L；小牛血清250mL/L；硫柳汞1g/L；陽(yáng)性血清 適量。
陰性對(duì)照：Na2HPO4•12H2O 2.9g/L；NaCl 8g/L；KCl 0.2g/L；KH2PO4 0.2g/L；硫柳汞 2g/L；乙二醇150mL/L；硫柳汞 1g/L；陰性血清 250mL/L。
顯色劑A：檸檬酸 8g/L；試劑A 0.004g/L；試劑B 2.4mL/L；過(guò)氧化尿素 0.7g/L。
顯色劑B：檸檬酸 2.1g/L；乙二胺四乙酸二鈉 0.38g/L；TMB 0.4 g/L。
終止液：2M H2SO4。
甲肝抗原：甲肝抗原1000mL/L；牛血清白蛋白 1g/L；指示劑2 1mL/L 。
需要但未提供的物品：
1. 新鮮的蒸餾水或去離子水
2. 一次性手套
3. 精確的微量移液器和潔凈的吸頭
4. 干凈的吸水紙
5. 37℃恒溫箱或水浴鍋
6. 計(jì)時(shí)器
7. 洗板機(jī)或洗瓶機(jī)
8. 振蕩器
【儲(chǔ)存條件及有效期】
試劑盒應(yīng)置2～8℃中避光保存，有效期12個(gè)月。
生產(chǎn)日期及有效期見(jiàn)標(biāo)簽。
【適用儀器】
酶標(biāo)儀 檢測(cè)波長(zhǎng)450nm，參考波長(zhǎng)630nm
【樣本要求】
1. 樣本采集不需要特殊準(zhǔn)備，不需要受檢者禁食，按照正常的采血技術(shù)收集血液，全血樣品最好先放置37℃處理2小時(shí)，再將血樣品充分離心，3000轉(zhuǎn)/分鐘離心6分鐘以上，使血清（漿）不含或極少含血細(xì)胞。如果為抗凝血樣品，應(yīng)將血樣品充分離心后，最好再放置室溫2小時(shí)以上。
2. 樣本可使用血清或血漿，檸檬酸、肝素或EDTA等抗凝劑不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
3. 樣本中含用疊氮鈉會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，高度溶血的樣本、沒(méi)完全收縮的血清樣本或有微生物污染的樣本可能會(huì)引起錯(cuò)誤的結(jié)果。
4. 新鮮的樣本在2～8℃無(wú)菌條件下可保存一星期，新鮮樣本可長(zhǎng)期貯存在-20℃或以下，避免反復(fù)凍融。
【檢驗(yàn)方法】
1. 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備：從冷藏環(huán)境中取出試劑盒，在室溫下平衡30分鐘，同時(shí)將濃縮洗滌液作1:20稀釋。
2．加樣：標(biāo)本用生理鹽水作1：1000稀釋后，用移液器吸取100微升，加入反應(yīng)板孔內(nèi)，并設(shè)陰性對(duì)照2孔，每孔100微升；陽(yáng)性對(duì)照2孔，每孔100微升；空白對(duì)照1孔；用封片封蓋反應(yīng)板。置37℃孵育30分鐘。
3．洗滌：棄去孔內(nèi)液體，用洗滌液注滿每孔，靜置30秒，甩干，反復(fù)5次，扣干。
4．同時(shí)加HAVAg和酶結(jié)合物各50微升，空白對(duì)照孔不加，充分混勻后用封片封蓋反應(yīng)板，置37℃孵育20分鐘。
5．重復(fù)3洗滌過(guò)程。
6．顯色：每孔滴加顯色劑A、B各50微升，混勻，置37℃孵育10分鐘。
7．加終止液：每孔滴加終止液50微升。
8. 測(cè)定：用酶標(biāo)儀讀數(shù)，可選擇單波長(zhǎng)450 nm（以空白孔校零）或雙波長(zhǎng)450/630 nm，讀取各孔OD值。讀數(shù)須在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成。
【陽(yáng)性判斷值】
酶標(biāo)儀讀數(shù)法（波長(zhǎng)450nm）：用空白孔校零點(diǎn)，然后讀取各孔OD值。
備注：陰性對(duì)照OD值低于0.05，以0.05計(jì)算，高于0.05按實(shí)際OD值計(jì)算。
【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1. 陰性結(jié)果表明樣本中不含甲肝IgM抗體（抗-HAVIgM），或樣本中的甲肝IgM抗體（抗-HAVIgM）含量低于試劑盒的檢測(cè)范圍。
2. 陽(yáng)性結(jié)果表明樣本中含有甲肝IgM抗體（抗-HAVIgM），或非特異反應(yīng)因素。
3. 陽(yáng)性結(jié)果的樣本需要再進(jìn)行重復(fù)實(shí)驗(yàn)，只有經(jīng)過(guò)重復(fù)或再重復(fù)實(shí)驗(yàn)仍為陽(yáng)性結(jié)果的樣本，可認(rèn)為是甲肝IgM抗體（抗-HAVIgM）陽(yáng)性。所有重復(fù)結(jié)果為陽(yáng)性的樣本應(yīng)經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)氖侄芜M(jìn)行確認(rèn)。
陽(yáng)性結(jié)果的樣本如復(fù)檢為陰性結(jié)果應(yīng)被認(rèn)為是陰性樣本，重復(fù)不出陽(yáng)性結(jié)果可能屬于下列一個(gè)或多個(gè)技術(shù)問(wèn)題引致：
1） 由于儀器或加樣器造成的交叉污染。
2） 顯色劑被金屬離子污染。
3） 由于試劑滴漏造成的交叉污染。
4） 不充分的洗板或最后吸去不徹底。
【檢驗(yàn)方法的局限性】
所有高敏感性的免疫實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)都存在潛在的非特異性反應(yīng)，所以重復(fù)的陽(yáng)性結(jié)果應(yīng)以一個(gè)適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行確認(rèn)。
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
1.試劑外觀為澄清透明液體，無(wú)絮狀沉淀物。
2.陰性參考品符合率：用10份陰性參考品檢測(cè)，結(jié)果不得出現(xiàn)假陽(yáng)性。
3.最低檢出限：用最低檢出限參考品檢測(cè)，應(yīng)≥1:16。
4.精密性：用精密性參考品測(cè)定，CV（％）應(yīng)不高于15％（n=10）。
5.穩(wěn)定性試驗(yàn)：試劑各組分置37℃至少6天，檢定結(jié)果應(yīng)達(dá)到2.1～2.5的要求。
6.裝量：≥標(biāo)示裝量。
【注意事項(xiàng)】
1. 本品僅用于體外診斷，僅限檢測(cè)人體血清、血漿；檢測(cè)結(jié)果作為診斷指標(biāo)之一。
2. 從2～8℃條件下取出的樣本應(yīng)置室溫平衡30分鐘再進(jìn)行檢測(cè)。
3. 須確保樣品加樣量的準(zhǔn)確，如果加樣不準(zhǔn)確，可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4. 使用微量移液器手工加樣時(shí)，每次應(yīng)該更換吸頭吸取樣本。
5. 用滴瓶滴加時(shí)，請(qǐng)將甁中液體搖勻，并棄去1～2滴后垂直勻速地滴加。要避免將組份中的液體觸到或?yàn)R到微孔邊緣上，特別是酶結(jié)合物。
6. 在操作過(guò)程中應(yīng)盡量避免反應(yīng)微孔中產(chǎn)生氣泡。
7. 濃縮洗滌液系高濃度磷酸鹽，可能會(huì)形成結(jié)晶，如未完全溶解，會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，同時(shí)可能會(huì)堵住自動(dòng)加樣器或洗板機(jī)管道。若出現(xiàn)結(jié)晶，請(qǐng)放置37℃充分溶解，然后稀釋混勻使用。
8. 封板膠紙不能重復(fù)使用。
9. 用水浴鍋反應(yīng)時(shí)，請(qǐng)將反應(yīng)板浸放于水中1/3，底部以網(wǎng)格支撐物支撐，水溫控制在37℃。
10. 洗板：1）以洗板機(jī)洗板時(shí)，洗板機(jī)的加液量至關(guān)重要，既避免洗液過(guò)量溢出，又能充滿反應(yīng)微孔中，洗板次數(shù)不應(yīng)少于5次，并經(jīng)常注意檢查加液頭是否堵塞。
2）手工洗板時(shí)，請(qǐng)勿使用帶紙屑的吸水材料拍板，以防外源性過(guò)氧化物酶類(lèi)似物或氧化還原物質(zhì)與顯色劑發(fā)生反應(yīng)，影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
3）洗板時(shí)所用的吸水紙請(qǐng)勿反復(fù)使用。
4）洗板機(jī)最好在每次使用前、后，用蒸餾水或去離子水清洗干凈，以防止管路堵塞或腐蝕。
11. 如果用任何試劑接觸皮膚和眼睛，必須用大量清水對(duì)該部位進(jìn)行擴(kuò)大清洗和消毒；終止液為硫酸，具有腐蝕性。
12. 試劑盒內(nèi)有關(guān)組份及臨床樣本均應(yīng)視為有潛在傳染性，請(qǐng)按相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室工作規(guī)范來(lái)執(zhí)行和處理。
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